小鼠原代細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)日漸成熟，但在同樣實(shí)驗(yàn)條件下不易獲得，而小鼠基因組與人類基因組有更多相似之處，具有更高的研究價(jià)值。改進(jìn)小鼠乳鼠原代心肌細(xì)胞的培養(yǎng)方法，得到純度高、活力強(qiáng)、保持心肌細(xì)胞原有結(jié)構(gòu)和功能的心肌細(xì)胞。

　　方法：將小鼠心肌組織利用酶消方法分離為單個(gè)的心肌細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)步驟中將經(jīng)典的胰酶、膠原蛋白酶混合酶消法分解開，先用胰酶消化心肌組織，使心肌組織變得松散，再用膠原蛋白酶，作用于細(xì)胞間質(zhì)的膠原纖維，使心肌組織分離為單個(gè)的小鼠原代細(xì)胞。調(diào)整胰酶和IⅡ型膠原蛋白酶的濃度和作用時(shí)間，嚴(yán)格控制試劑pH值和各步驟的溫度。

　　結(jié)果與結(jié)論：心肌細(xì)胞在接種24h后開始貼壁，48h后可觀察到部分心肌細(xì)胞出現(xiàn)自主搏動，72h后彼此形成交聯(lián)，96h后可觀察到心肌細(xì)胞形成細(xì)胞簇，并出現(xiàn)一致性搏動。心肌細(xì)胞的存活率和純度均達(dá)95%以上。結(jié)果證實(shí)，實(shí)驗(yàn)采用改良方法成功培養(yǎng)出小鼠原代細(xì)胞，并且保留心肌細(xì)胞的結(jié)構(gòu)和功能，純度和成活率高，是可行的培養(yǎng)方法。

　　小鼠原代細(xì)胞之所以大力培養(yǎng)原因是小鼠基因組與人類基因組有更多相似之處，具有更高的研究價(jià)值。國內(nèi)外學(xué)者對通過培養(yǎng)原代乳鼠心肌細(xì)胞，從而進(jìn)一步研究心肌細(xì)胞對缺氧、缺血等相關(guān)心臟疾病的發(fā)病機(jī)制進(jìn)行了大量工作。大鼠心肌細(xì)胞原代培養(yǎng)技術(shù)日漸成熟，但是小鼠心肌細(xì)胞在同樣實(shí)驗(yàn)條件下不易獲得。采用混合酶消化心肌細(xì)胞，而是先用胰酶消化，后用膠原蛋白酶消化的實(shí)驗(yàn)方法獲得心肌細(xì)胞，此種操作方法可得到純度高、活力強(qiáng)、保持心肌細(xì)胞原有結(jié)構(gòu)和功能的心肌細(xì)胞。